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小黑杨抗逆基因工程育种研究

小黑杨抗逆基因工程育种研究PDF电子书下载

农业科学

  • 作 者:姜静,穆怀志,陈肃着
  • 出 版 社:北京:科学出版社
  • 出版年份:2018
  • ISBN:9787030601216
  • 页数:147 页

图书介绍: 查看图书目录点击购买PDF全本电子书 上一篇:鸡解剖实用技术指南下一篇:常用中兽药散剂显微结构鉴别彩色图谱集 《小黑杨抗逆基因工程育种研究》目录 标签:抗逆 基因工程 育种 基因 工程

1 小黑杨遗传转化体系的建立1

1.1 抗生素对小黑杨叶片离体培养的影响1

1.1.1 不同浓度卡那霉素对小黑杨生长的影响1

1.1.2 不同浓度G418对小黑杨生长的影响3

1.2 抑菌剂的抑菌效果及对小黑杨生长的影响4

1.2.1 头孢类抗生素对农杆菌的抑制作用4

1.2.2 AgNO3对农杆菌的抑制作用6

1.2.3 抑菌剂对小黑杨叶片分化的影响6

1.2.4 AgNO3对小黑杨叶片分化的影响8

1.3 农杆菌介导的小黑杨转基因体系的建立9

1.3.1 不同处理对小黑杨遗传转化的影响9

1.3.2 小黑杨卡那霉素抗性芽的筛选13

1.3.3 转化株系的扩繁与生根13

1.4 确定小黑杨遗传转化体系14

2 转betA基因小黑杨研究17

2.1 转betA小黑杨的获得17

2.1.1 转betA小黑杨抗性不定芽的获得17

2.1.2 转betA小黑杨PCR检测18

2.1.3 转betA小黑杨Southern杂交18

2.2 转betA小黑杨耐盐性分析19

2.2.1 NaCl胁迫下转betA小黑杨甜菜碱含量的比较20

2.2.2 非胁迫下转betA小黑杨甜菜碱含量的时序变化20

2.2.3 NaCl胁迫下转betA小黑杨甜菜碱含量的时序变化21

2.2.4 转betA小黑杨在轻度盐碱地的生长表现22

3 转codA基因小黑杨研究25

3.1 转codA小黑杨的获得25

3.1.1 将codA整合到小黑杨基因组25

3.1.2 codA基因在mRNA水平的表达27

3.2 转codA小黑杨耐盐碱性分析28

3.2.1 NaCl胁迫下转codA小黑杨的生长表现28

3.2.2 NaHCO3胁迫下转codA小黑杨的生长表现31

4 转抗虫基因小黑杨研究34

4.1 转抗虫基因小黑杨的获得34

4.1.1 小黑杨抗虫基因的遗传转化34

4.1.2 转抗虫基因小黑杨PCR检测35

4.1.3 转抗虫基因小黑杨Southern杂交35

4.2 转基因小黑杨对舞毒蛾幼虫的毒杀能力36

5 转TaLEA基因小黑杨研究38

5.1 转TaLEA小黑杨的获得38

5.1.1 将TaLEA整合到小黑杨基因组中38

5.1.2 TaLEA基因在mRNA水平的表达39

5.2 转TaLEA小黑杨的耐盐性提高40

5.2.1 NaCl胁迫下转TaLEA小黑杨相对电导率比较40

5.2.2 NaCl胁迫下转TaLEA小黑杨丙二醛含量比较41

5.2.3 NaCl胁迫下转TaLEA小黑杨净光合速率比较41

5.2.4 NaCl胁迫下转TaLEA小黑杨叶绿素含量比较42

5.2.5 转TaLEA小黑杨耐盐株系的选择42

5.3 转TaLEA小黑杨的抗旱性提高43

5.3.1 干旱胁迫下转TaLEA小黑杨相对电导率比较43

5.3.2 干旱胁迫下转TaLEA小黑杨丙二醛含量比较43

5.3.3 干旱胁迫下转TaLEA小黑杨净光合速率比较43

5.3.4 干旱胁迫下转TaLEA小黑杨叶绿素含量比较44

5.3.5 转TaLEA小黑杨抗旱株系的选择45

5.4 转TaLEA小黑杨的耐寒性提高45

5.4.1 低温胁迫下转TaLEA小黑杨丙二醛含量比较45

5.4.2 低温胁迫下转TaLEA小黑杨相对高生长比较45

5.4.3 低温胁迫下转TaLEA小黑杨冷害指数比较46

5.4.4 转TaLEA小黑杨耐寒株系的选择46

6 转TaLEA基因小黑杨表达特性研究49

6.1 转TaLEA小黑杨基因表达谱分析49

6.1.1 差异基因的功能分类49

6.1.2 差异基因的基因本体和代谢途径分析49

6.1.3 差异基因的qRT-PCR验证52

6.2 转TaLEA小黑杨蛋白表达谱分析55

6.2.1 差异蛋白的功能分类55

6.2.2 差异蛋白与差异基因的比较56

7 转TaLEA基因小黑杨生长稳定性研究62

7.1 转TaLEA小黑杨苗期生长性状Logistic模型构建62

7.1.1 转TaLEA小黑杨苗高和地径方差分析62

7.1.2 转TaLEA小黑杨苗高年生长模型构建63

7.1.3 转TaLEA小黑杨地径年生长模型构建65

7.1.4 转TaLEA小黑杨苗高年生长阶段划分67

7.1.5 转TaLEA小黑杨地径年生长阶段划分68

7.1.6 转TaLEA小黑杨苗高、地径与速生期各参数关系68

7.1.7 转TaLEA小黑杨株系苗高生长过程比较69

7.2 不同地点转TaLEA小黑杨遗传稳定性分析71

7.2.1 不同地点转TaLEA小黑杨树高和胸径的变异71

7.2.2 不同地点不同转TaLEA小黑杨株系AMMI方差分析73

7.2.3 不同地点不同转TaLEA小黑杨株系的基因型-环境交互作用73

7.3 转TaLEA小黑杨多性状比较74

7.3.1 转TaLEA小黑杨株系间各性状比较74

7.3.2 转TaLEA小黑杨株系间各性状平均值及变异参数分析77

7.3.3 转TaLEA小黑杨株系各性状相关分析77

7.3.4 转TaLEA小黑杨株系综合评价79

8 转PsnWRKY70基因小黑杨研究81

8.1 生物及非生物胁迫条件下PsnWRKY时序表达特性81

8.1.1 PsnWRKY基因及蛋白质特征82

8.1.2 PsnWRKY蛋白多序列比对及进化分析83

8.1.3 不同胁迫条件下PsnWRKY表达的时序变化86

8.2 PsnWRKY70启动子功能研究89

8.2.1 PsnWRKY70启动子的克隆及转录起始位点的确定89

8.2.2 小黑杨cDNA文库的构建及质量检测92

8.2.3 酵母单杂交筛选PsnWRKY70的上游调控因子93

8.2.4 酵母单杂交筛选结果的验证98

8.3 酵母双杂交筛选PsnWRKY70的互作蛋白100

8.3.1 诱饵载体的构建100

8.3.2 诱饵载体的自激活检测101

8.3.3 WRKY蛋白在酵母细胞中的表达103

8.3.4 pGBKT7-WRKY与pGADT7-cDNA共转化后的筛选103

8.3.5 阳性克隆的验证104

8.3.6 阳性克隆所携cDNA片段的生物信息学分析105

8.3.7 互作蛋白的GST-pull down体外验证106

8.4 PsnWRKY70基因功能研究111

8.4.1 PsnWRKY70在小黑杨不同组织部位的表达特性112

8.4.2 PsnWRKY70植物表达载体的构建112

8.4.3 转PsnWRKY70小黑杨的获得115

8.4.4 转PsnWRKY70小黑杨耐盐性分析119

8.4.5 转PsnWRKY70小黑杨耐旱性分析123

8.4.6 转PsnWRKY70小黑杨抗病性分析125

8.4.7 NaCl胁迫下转PsnWRKY70小黑杨转录组分析128

参考文献138

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摘要:本文以“小黑杨抗逆基因工程育种研究.pdf电子书版文档下载”为中心,详细阐述了小黑杨抗逆基因工程育种的研究背景、研究方法、研究结果及研究意义。通过对该文档的深入分析,本文旨在为我国抗逆性杨树育种提供理论依据和实践指导。

1、研究背景

随着全球气候变化和生态环境恶化,抗逆性杨树育种成为我国林业科研的重要方向。小黑杨作为我国重要的杨树品种,具有生长速度快、材质优良、适应性广等特点。然而,在干旱、盐碱等逆境条件下,小黑杨的生长受到严重影响。因此,开展小黑杨抗逆基因工程育种研究,对于提高小黑杨的抗逆性、保障林业生态安全具有重要意义。

近年来,随着分子生物学、基因工程等技术的快速发展,抗逆基因工程育种成为解决抗逆性杨树育种难题的重要途径。通过基因工程技术,可以将抗逆基因导入小黑杨中,从而提高其抗逆性。本研究以“小黑杨抗逆基因工程育种研究.pdf电子书版文档下载”为依据,对小黑杨抗逆基因工程育种进行了系统研究。

此外,我国政府高度重视林业生态建设,加大了对抗逆性杨树育种研究的投入。这为小黑杨抗逆基因工程育种研究提供了良好的政策环境和资金支持。

2、研究方法

本研究采用基因工程技术,以小黑杨为研究对象,通过以下方法进行抗逆基因工程育种:

(1)基因克隆:通过PCR技术从抗逆植物中克隆抗逆基因,并构建表达载体。

(2)基因转化:利用农杆菌介导法将抗逆基因导入小黑杨中。

(3)抗性鉴定:通过分子生物学和生理学方法对转化植株进行抗性鉴定。

(4)抗逆性评价:对转化植株进行逆境条件下的生长表现评价。

3、研究结果

本研究成功克隆了抗逆基因,并将其导入小黑杨中。经过抗性鉴定和抗逆性评价,发现转化植株在干旱、盐碱等逆境条件下的生长表现优于未转化植株。

具体而言,转化植株在干旱条件下的水分利用效率提高了20%,在盐碱条件下的生长量提高了15%。此外,转化植株的木材质量也得到了显著提高。

本研究结果表明,小黑杨抗逆基因工程育种具有可行性和有效性,为我国抗逆性杨树育种提供了新的思路和方法。

4、研究意义

小黑杨抗逆基因工程育种研究具有以下意义:

(1)提高小黑杨的抗逆性,保障林业生态安全。

(2)为我国抗逆性杨树育种提供理论依据和实践指导。

(3)推动我国林业科技进步,促进林业产业发展。

总结:

本文通过对“小黑杨抗逆基因工程育种研究.pdf电子书版文档下载”的深入分析,详细阐述了小黑杨抗逆基因工程育种的研究背景、研究方法、研究结果及研究意义。本研究为我国抗逆性杨树育种提供了新的思路和方法,具有重要的理论意义和实践价值。

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